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人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒免費代測本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。
本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍： 96T
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中降鈣素原(PCT)水平。用純化的降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加蛋白激酶B(PKB)，再與HRP 標(biāo)記的降鈣素原(PCT)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素原(PCT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，通過標(biāo)準曲線計算樣品中降鈣素原(PCT)濃度。
試劑盒組成：
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標(biāo)準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶
9 標(biāo)準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1 個
標(biāo)本要求
1. 標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2. 不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)活性。
操作步驟
1. 標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
60 ng/L5 號標(biāo)準品150µl 的原倍標(biāo)準品加入 150µl 標(biāo)準品稀釋液
30 ng/L4 號標(biāo)準品150µl 的 5 號標(biāo)準品加入 150µl 標(biāo)準品稀釋液
15 ng/L3 號標(biāo)準品150µl 的 4 號標(biāo)準品加入 150µl 標(biāo)準品稀釋液
7.5 ng/L2 號標(biāo)準品150µl 的 3 號標(biāo)準品加入 150µl 標(biāo)準品稀釋液
3.75 ng/L1 號標(biāo)準品150µl 的 2 號標(biāo)準品加入 150µl 標(biāo)準品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，
然后再加待測樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù) 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
人降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒免費代測
操作程序總結(jié)：
計算:
以標(biāo)準物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準物的濃度與 OD 值計算出標(biāo)準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，
即為樣品的實際濃度。
人降鈣素原(PCT)ELISA檢測試劑盒
保存條件及有效期
1. 試劑盒保存：;2-8℃。
2. 有效期：6 個月
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