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豬肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/5/29瀏覽:109次
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  豬肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  BS-8208 豬肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒

  以下是天津本生豬肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法(或一步夾心法)檢測樣本中的HB-EGF濃度。通過包被抗體捕獲目標蛋白,再結(jié)合酶標抗體形成復(fù)合物,經(jīng)TMB顯色后測定OD值,濃度與吸光度呈正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  主要成分?

  預(yù)包被微孔板

  標準品(通常含凍干粉,需用稀釋液重構(gòu))

  酶標抗體、顯色劑(A/B液)、終止液

  濃縮洗滌液(需稀釋使用)

  保存條件?

  未開封試劑需2-8℃保存,標準品及樣本稀釋后建議分裝凍存(-20℃以下),避免反復(fù)凍融。

  三、樣本處理

  血清/血漿?:離心去除雜質(zhì)(1000×g,15-20分鐘),溶血樣本不可用。

  組織勻漿?:需用PBS沖洗后勻漿,離心取上清(5000×g,5-10分鐘)。

  細胞培養(yǎng)上清?:直接離心(1000×g,20分鐘)后檢測。

  四、操作步驟

  標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(通常為2倍系列稀釋)。

  加樣與溫育?:

  每孔加入標準品或樣本100μL,37℃孵育1-2小時。

  洗滌?:使用稀釋后的洗滌液洗板4-6次。

  顯色與終止?:

  加入TMB顯色液,避光反應(yīng)10-15分鐘,后加終止液。

  檢測?:450nm波長讀取OD值,繪制標準曲線計算濃度。

  五、注意事項

  避免試劑交叉污染,不同批號組件勿混用。

  顯色時間需嚴格控制,強陽性樣本可能需進一步稀釋。

  實驗前需平衡所有試劑至室溫(約30分鐘)。

  如需具體參數(shù)(如標準品初始濃度、靈敏度等),請參考試劑盒配套說明書或咨詢技術(shù)老師。

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