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豬白介素12(IL-12)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
以下是天津本生豬白介素12(IL-12)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明摘要:
BS-4657 豬白介素12(IL-12)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法:包被抗豬IL-12抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-12,依次加入生物素化檢測(cè)抗體和酶標(biāo)試劑,通過(guò)TMB顯色反應(yīng)測(cè)定OD值,濃度與吸光度成正比。
二、試劑盒組成
標(biāo)準(zhǔn)品?:通常為4ng/瓶(2瓶)或梯度濃度(如0-2000 pg/mL)
酶標(biāo)板?:預(yù)包被抗體的96孔板
檢測(cè)抗體?:HRP標(biāo)記的抗體工作液
洗滌液?:20×濃縮液需稀釋使用
顯色液(TMB)?及終止液
三、操作步驟
樣本準(zhǔn)備?:血清/血漿需離心(3000rpm, 10分鐘),組織勻漿需研磨離心。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說(shuō)明書(shū)梯度稀釋(如原倍標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至125-2000 pg/mL)。
加樣?:
標(biāo)準(zhǔn)孔:50μL標(biāo)準(zhǔn)品
樣本孔:40μL稀釋液 + 10μL樣本(最終稀釋5倍)。
溫育?:37℃孵育30分鐘,洗滌5次。
顯色?:加入TMB避光顯色15分鐘,終止后15分鐘內(nèi)測(cè)450nm OD值。
四、注意事項(xiàng)
試劑盒需2-8℃保存,使用前平衡至室溫。
洗滌需,避免孔間交叉污染。
計(jì)算結(jié)果時(shí)需乘以稀釋倍數(shù)(如5倍)。
五、檢測(cè)范圍與性能
靈敏度?:通常<1.0 IU/mL。
檢測(cè)范圍?:10-240ng/L或6.25-2000 pg/mL(不同品牌有差異)。
完整操作請(qǐng)以具體試劑盒說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn),以上資料僅供參考。
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