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　　兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒

　　中文名稱(chēng)：兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒

　　英文名稱(chēng)：rabbitneurotrophin3,NT-3ELISAKit

　　貨號(hào)：BS-4164

　　規(guī)格：48T/96T

　　品牌：BUNSEN

　　儲(chǔ)存溫度：：-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))

　　有效期：6個(gè)月

　　ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

　　1.血清標(biāo)本收集、處理、保存方法：

　　用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，全血標(biāo)本室溫放置1-2h或4℃過(guò)夜，然后4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

　　2.血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法：

　　根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本，室溫混合20min左右，然后4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。

　　3.尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

　　用干凈容器收集尿液，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。

　　4.唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法：

　　用干凈離心管收集唾液，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。

　　5.細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:

　　(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清

　　取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中，4℃、3000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。

　　(2)細(xì)胞裂解液

　　收集細(xì)胞培養(yǎng)液，4℃、3000rpm/min離心20min，棄去上清，用預(yù)冷的PBS(0.01M，PH7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min，除去細(xì)胞碎片，取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。

　　6.植物標(biāo)本收集、處理、保存方法：

　　取適量大小組織塊(一般0.2-0.5g)，用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M，PH7.4)漂洗三次，濾紙拭干水分。準(zhǔn)確稱(chēng)重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05mol/LTris-HCl，pH7.4PBS緩沖液)于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機(jī)器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000rpm/min離心20min，取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。

　　7.糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法：

　　采集時(shí)用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M，PH7.4)，攪拌均勻。然后4℃、10000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。

　　8.組織標(biāo)本收集、處理、保存方法：

　　將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M，PH7.4)沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱(chēng)重，記錄后剪碎(碎塊盡量小)。將組織按一定的比例(通常組織重量：PBS體積=1：9)加入預(yù)冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿，勻漿時(shí)置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000rpm/min離心20min，小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間)，避免反復(fù)凍融。

　　兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒

　　1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

　　2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

　　3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6.底物請(qǐng)避光保存。

　　試劑盒靈敏度、精密度、穩(wěn)定性

　　1.靈敏度：有二層含義，1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的量的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽(yáng)性檢出的能力。2.特異性：常用交叉反應(yīng)率表示。其越高說(shuō)明特異性越好。

　　3.精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV，其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線(xiàn)性范圍

　　4.穩(wěn)定性：試劑在規(guī)定條件下能儲(chǔ)存的時(shí)間，一般采用破壞性試驗(yàn)即將試劑存放于37℃保存，定期測(cè)定其靈敏度，特異性和精密度等指標(biāo)，直到其質(zhì)量指標(biāo)開(kāi)始下降為止，通常認(rèn)為37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個(gè)半月。

　　5.簡(jiǎn)便性：指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下，實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好，在定性試驗(yàn)中結(jié)果判斷簡(jiǎn)單明了，定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)單。

　　6.安全性：指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性。

　　7.經(jīng)濟(jì)性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過(guò)大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場(chǎng)價(jià)格比較合理。