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什么是elisa試劑盒?elisa試劑盒用來檢測什么?
什么是elisa試劑盒?elisa是一種免疫學實驗操作實驗,中文名字叫酶聯(lián)免疫吸附測定實驗。酶聯(lián)免疫吸附實驗(elisa)是一種用來定量檢測樣本中的某種抗原方法。因此,因此在許多研究和檢測領域中使用 ELISA 來檢測和定量各種樣本類型中的抗原,如使用 ELISA 分析細胞裂解物、血樣、食品等特定物質(zhì)。常見檢測領域包括如生物學、醫(yī)學、農(nóng)學等。
elisa試劑盒原理
酶聯(lián)免疫吸附實驗(elisa)是一種高敏度的定量實驗,通常用于測量生物樣品中分析物的濃度,如細胞因子和抗體。這種方法的一般原理包括三個步驟:
首先是將目標分析物捕獲或固定在微孔板上,然后用目標特異性檢測蛋白檢測分析物,最后就是酶反應,既共軛酶將底物轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物。根據(jù)不同的捕獲方法和檢測方法。
elisa方法
ELISA有四種主要的方法:直接法、間接法、夾心法和競爭法。每種類型的描述如下,并用圖說明了分析物和抗體是如何結合和使用的。
1.直接法(酶標抗體結合抗原)
待測抗原粘附在微孔板的孔內(nèi),然后使用帶酶標的一抗與抗原結合,最后加入底物進行顯色,并檢測吸光度。由于吸光度的大小與抗原體復合物的數(shù)量成一定的線性關系。因此,也就間接的實現(xiàn)了測定抗原數(shù)量的目標。
2.間接法(一抗結合抗原,酶標二抗結合一抗)
和直接法的區(qū)別在于兩種抗體代替一種抗體,結合抗原的抗體(一抗)不帶酶標記物,當抗原和抗體結合后,再使用帶酶標的二抗結合一抗,加入底物顯色并檢測。
3.夾心法(捕獲抗體和一抗結合抗原,酶標二抗結合一抗)
在間接法基礎上又再發(fā)展出更為復雜的夾心法,它在微孔底部預先包被一種捕獲抗體,用于結合抗原,在這個復合物的基礎上再結合一抗、二抗并檢測。
4.競爭法(酶標抗原和抗原競爭結合抗體)
無法同時結合捕獲抗體和一抗的話,就不適合用夾心檢測。此時可以在微孔板孔內(nèi)包被抗體,同時提供帶標記的同種抗原,把待檢測抗原和標記抗原一起加入和抗體結合,由于兩者會競爭結合抗體,所以最終檢測的信號越高,證明代測抗原越少,反之則越多。
elisa試劑盒檢測步驟
ELISA 是簡單的血液檢測之一。它快速、快捷,并且需要患者的血液樣本。ELISA的整個過程如下所述。
抗體附著在作為固體表面的聚苯乙烯板上,并被細菌、其他抗體和激素吸引或具有親和力。
將抗原-抗體混合物填充到包被有抗原的微量滴定板上,然后通過洗滌除去游離抗體。
添加對一抗具有特異性的二抗,該二抗通常與酶結合。
通過清洗板去除游離的酶聯(lián)二抗。
最后,添加底物。底物被酶轉(zhuǎn)化形成有色產(chǎn)物,可以通過分光光度法進行測量。
通過ELISA檢測表明懷孕的HCG蛋白。將血液或尿液樣本和與酶連接的純化 HCG 組合添加到系統(tǒng)中。如果測試樣品中不存在 HCG,則只有連接的酶與固體表面結合。
elisa試劑盒是用來檢測什么的
elisa檢測如下:
可以確定樣品中抗體和抗原的存在。
它在食品工業(yè)中用于檢測存在的任何食品過敏原。
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