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本生課堂：使用PCR板時防止錯誤的五大技巧
聚合酶鏈式反應 (PCR) 是生命科學實驗室中廣為人知的方法之一。PCR 板由的塑料制成，可對收集的樣品或結果進行出色的處理和分析。它們具有薄而均勻的壁，可提供精確的熱傳遞。在為實時應用做準備時，DNA 或 RNA 的微小部分被隔離并儲存在 PCR 板中。PCR 板在熱封方面非常有效，并且還限制了熱量的流動。然而，由于 PCR 板有效且可靠，在處理樣品時容易出錯和不準確。因此，如果您有興趣獲得優(yōu)質的PCR板。最好聯(lián)系可靠的 PCR 板制造商。有了這個，您可以確保獲得的價格。以下是一些注意事項，可避免試劑或樣品受到污染，并防止結果不準確。
對環(huán)境進行消毒:
由于存在雜質，會出現(xiàn)不正確的陽性或陰性結果，這會讓您懷疑結果。
雜質和污染物以各種形式出現(xiàn)，例如不相關的 DNA 或化學添加劑，最終會降低反應的效率和有效性。
有許多方法可以大大降低 PCR 板的污染率。
使用已滅菌的濾芯吸頭是另一種防止雜質通過移液器進入樣品的有用方法。
提供一套干凈的設備，包括移液器和架子，專門用于 PCR。這將保證實驗室周圍的雜質或污染物轉移可忽略不計。
在移液器、架子和長凳上使用漂白劑、乙醇來擦去污染物。
為所有 PCR 反應分配預留空間，以進一步減少顆粒污染。
在每一步都使用干凈的手套并經常更換。
PCR 板
檢查模板的濃度和純度。
應保持使用 PCR 分析樣品時使用的工作臺和設備的清潔度。在分析和處理之前驗證樣品的純度至關重要。
通常，分析儀會考慮 DNA 樣本的濃度和純度水平。
爭取260nm/280nm的吸光度比不得小于1.8。而隨后使用 230nm 和 320nm 之間的波長來識別雜質。
在一個例子中，離液鹽和其他有機化合物在 230nm 的吸收率下被檢測到。同時在 320nm 的吸光度下檢測和驗證 DNA 樣品中的濁度。
避免 PCR 板與產品過載：
盡管希望同時運行多個產品，但它會導致 PCR 板的交叉污染。
用不同的產品使 PCR 板超載會浪費，并且很難確定樣品。
保留等分 PCR 試劑的記錄：
連續(xù)冷凍/解凍循環(huán)和頻繁使用等分可能會通過重結晶損壞 PCR 試劑、酶和 DNTP。
在準備要分析的樣品時，始終努力監(jiān)控使用的等分試樣的速率。
優(yōu)選的 LIMS 更適合控制試劑和樣品冷凍或解凍的庫存和數(shù)量。
選擇最佳退火溫度。
選擇和使用錯誤的退火溫度是另一種方法 PCR 結果包含錯誤。
有時，反應并沒有按計劃進行。需要降低退火溫度以促進成功的反應。
然而，降低溫度會增加假陽性和引物二聚體出現(xiàn)的機會。
在使用 PCR 板時，確認熔解曲線的分析具有重要意義，因為它是選擇正確退火溫度的良好指標。
引物設計軟件輔助設計，提供正確的退火溫度，直接減少 PCR 板中的錯誤。
PCR板本生一直視質量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。
