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如何選擇ELISA檢測試劑盒進行各項實驗條件?
更新時間:2022-11-24瀏覽:1170次

  如何選擇ELISA檢測試劑盒進行各項實驗條件?


  使用ELISA檢測試劑盒進行試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng)。

  在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

  固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯yixi、聚苯y(tǒng)ixi、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯y(tǒng)ixi凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

  包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。

  本生技術(shù)提醒:除此之外還要注意以下事項:

  1.確定ELISA檢測試劑盒在有效期內(nèi);

  2.仔細閱讀說明書;

  3.按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積);

  4.標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存;

  5.根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量;

  6.準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;

  7.按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。

  ELISA檢測試劑盒天津本生既能滿足研發(fā)類客戶對產(chǎn)品種類、包裝的特殊要求,也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)?;a(chǎn)各個階段的綜合需求。產(chǎn)品涵蓋有熒光定量PCR耗材(八聯(lián)管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等),ELISA試劑盒,移液器吸嘴,離心管,凍存管,培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,吸頭,儀器及手套,培養(yǎng)基,抗體,血清,色譜耗材,針頭過濾器及實驗室常用耗材。 品種類超過萬種,廣泛應(yīng)用于科研院校、中心實驗室、分子生物學(xué)等科研域。

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